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技術(shù)小知識：被冷凍后的試劑盒質(zhì)量會受損嗎?

我們知道，完整的ELISA試劑盒包含：

①酶的底物；

②已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)；

③酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物)；

④結(jié)合物及標本的稀釋液；

⑤洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；

⑥陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標準品和控制血清(定量測定中)；

⑦酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的體積而異，在板式ELISA中一般采用2mol/L。

那么被冷凍后的試劑盒質(zhì)量會受損嗎？景源實驗為您解答：

為其保存后可以使用，但不能反復凍融，如果您在一周之內(nèi)做實驗，可以2-8℃保存;如果您在一周至一個月之內(nèi)做實驗，可以-20℃保存如果您在一個月以上做實驗，可以-80℃保存。但是值得注意的是凍融一次比2-8℃保存損失的更大損失主要是蛋白的降解，凍融一次蛋白都有降解。

在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學研究時，實驗表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1～2小時，產(chǎn)物的天生可達ding峰。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫順4℃等。室溫溫育時要平置于操縱臺上即可。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴，可將ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度迅速平衡。操縱時的室溫應(yīng)嚴格限制在劃定的范圍內(nèi)，尺度室溫溫度是指20～25℃，但詳細操縱時可根據(jù)仿單的要求控制溫育。