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參考資料 8366

用于癌癥測量的 EGFR 和 MET 基因拷貝數(shù)標準

參考材料 (RM) 8366 旨在協(xié)調(diào)人類表皮生長比率的測量因子基因 (EGFR) 和人類 MET 原癌基因、受體酪氨酸激酶基因 (MET) 到未擴增的參考基因。已經(jīng)報道了 EGFR 基因擴增和相關的蛋白質(zhì)表達增加，并與許多人類惡性腫瘤的發(fā)病機制有關。 EGFR基因的擴增（增加的拷貝）和幾種癌癥中的蛋白質(zhì)過表達被用作確定治療和治療的生物標志物預測抗EGFR靶向治療的臨床結果[1]。已在肺癌、胃癌和肝細胞癌中描述了導致蛋白質(zhì)表達增加和 MET 受體組成型激活的 MET 基因擴增。

NIST SRM 8366 EGFR和MET 基因拷貝數(shù)標準

進行了各種臨床試驗以評估其安全性和有效性癌癥患者的選擇性 MET 抑制劑。然而，準確可靠地評估 MET 水平仍然是一項挑戰(zhàn) [2]。 RM 8366 由從六種人類癌細胞系中提取的基因組 DNA 組成，具有不同數(shù)量的 EGFR 和 MET 基因擴增。六種純化的基因組 DNA 位于由 10 mmol/L 2-氨基-2-(羥甲基)丙烷-1,3-二醇 (Tris) 和 0.1 mmol/L 乙二胺四乙酸二鈉鹽 (EDTA) pH 8.0 (TE -4. 六種成分是來自人類細胞系A-431、BT-20、C32、Daoy、Hs 746T和SNU-5的基因組DNA材料，并標記為A、B、C、D、E和F，分別。

在 260 nm 處通過吸光度測量確定的組分 A、B、C、D、E 和 F 的濃度分別為 21.6 µg/mL、21.7 µg/mL、21.5 µg/mL、22.9 µg/mL、23.1 µg/mL 和 21.0微克/毫升，分別。在準備稀釋液時，重要的是要考慮各個組分中 EGFR 和 MET 的擴增水平，以確保 EGFR 和 MET 拷貝數(shù)在您正在使用的檢測的工作范圍內(nèi)。一個單位的 RM 由每個組分的一個小瓶組成，其中包含大約 100 μL 的 DNA 溶液。這些小瓶中的每一個都貼有標簽，并且用顏色編碼的螺帽密封。

參考值：

每個參考基因的 EGFR 和 MET 拷貝的參考比率與 95% 可信區(qū)間和 95% 預測區(qū)間顯示在表 1 和表 2 中。NIST 參考值是 NIST 證書上提供的真實值的最佳估計， NIST [3] 未對所有已知或可疑的偏倚來源進行全面調(diào)查的分析證書或調(diào)查報告。

NIST SRM 8366 EGFR和MET 基因拷貝數(shù)標準

信息值：

表 3 顯示了每微升 EGFR、MET 和參考基因拷貝的信息值。信息值被認為是 RM 用戶感興趣和使用的值，但沒有足夠的信息來評估與該值相關的不確定性或僅進行了有限數(shù)量的分析 [3]。信息值不能用于建立計量溯源性。